métodos microbiológicos para estudio de agua, suelo y aire

Microorganismos – diminutas criaturas, en su mayoría unicelulares, que son muy extendido en la naturaleza. Se encuentran en todos los medios (aire, suelo, agua) en humanos y animales, en las plantas.

la diversidad cualitativa y número de organismos dependen principalmente de compuestos nutricionales. Pero también es importante como humedad, temperatura, aireación y la acción de la luz solar y otros factores.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Los métodos para medios naturales sanitario y estudios microbiológicos pueden detectar la presencia de patógenos y para determinar su cantidad, de acuerdo con los resultados obtenidos, para desarrollar medidas para eliminar o prevenir las enfermedades infecciosas. Además, se necesita cuenta cuantitativo para la modelización de ecosistemas y el desarrollo de los procesos naturales de la gobernabilidad. . Consideremos además cuáles son los métodos de examen microbiológico.

suelo

Es considerado por los estudiosos como una de las posibles vías de transmisión de patologías infecciosas. Con secreciones paciente humano o animal en los patógenos de penetración del suelo. Algunos de ellos, en particular, de esporas, pueden persistir en el suelo durante mucho tiempo (a veces durante décadas). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). El suelo de la caída patógenos tales infecciones peligrosas como el tétanos, ántrax, el botulismo, y así sucesivamente. Métodos de estudio sanitario y microbiológico del suelo permiten definir "recuento microbiano" (el número de microorganismos en el suelo de un gramo), y el índice coli (el número de E. coli) .

Análisis de suelo: una visión general

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Los métodos para el examen microbiológico del suelo deben atribuirse principalmente microscopía y cultivo directo en sólido medio nutriente. Las poblaciones de microorganismos y sus grupos que habitan en el suelo, difieren en la situación taxonómica y funciones ecológicas. En la ciencia, están unidos bajo el término genérico "biota del suelo." Primer – hábitat gran número de microorganismos. En gramo de suelo está presente de 1 a 10 mil millones de dólares sus células. En este entorno, se lleva activa la descomposición de la materia orgánica, con la participación de varios microorganismos saprófitos.

Los estudios microscópicos de método microbiológico: los pasos

El análisis del medio comienza con el muestreo. Para este fin, previamente peladas y ralladas cuchillo de alcohol (pala se puede utilizar). Después de eso, la preparación de la muestra. El siguiente paso – el recuento de células frotis teñidos. Considere cada etapa por separado.

muestreo

En el análisis de los suelos agrícolas tienden muestra tomada de una profundidad de toda la capa. Primero eliminado 2-3 cm por encima del suelo, ya que puede estar presente en una microflora extraña. A partir de entonces, con una superficie de suelo estudiado tomar monolitos. La longitud de cada uno de ellos debe cumplir con el espesor de la capa desde la que se desea muestrear.

En una parcela de 100-200 sq. 7-10 m muestras seleccionadas. El peso de cada – del orden de 0,5 kg. Las muestras deben mezclarse bien en la bolsa. Luego tomar la muestra media un peso aproximado de 1 kg. Debe ser colocado en el paquete de pergamino (estéril) encerrada en una bolsa de tela. Antes del análisis de la muestra almacenada en el refrigerador dirigir.

Preparación de la inspección

El suelo se agitó vertió el cristal seco. Su pre-limpie con alcohol y quemar por encima del quemador. Con un suelo espátula mezcla a fondo y ampliado de manera uniforme. Es obligatorio para eliminar las raíces y otros elementos extraños. Para ello, utilice pinzas. Antes de pinzas y espátula de operación por encima del quemador se prende fuego para enfriar.

De las diversas parcelas de suelo distribuidas en el cristal, seleccionado pequeñas porciones. Se pesaron en un plato de porcelana en una escala técnica. является специальная обработка образца. método microscópico paso obligatorio de estudios microbiológicos es el procesamiento especial de la muestra. 2 debe estar preparado con antelación, frasco estéril. Su tamaño no debe superar los 250 ml. Uno de los matraces se vierte en 100 ml de agua del grifo. Debido a que toma 0,4-0,8 ml de muestra líquida de suelo y se humedece a una pasta. La mezcla se debe frotar con un dedo o caucho mano de mortero durante 5 minutos.

El agua de la primera matraz se transfiere a la masa de suelo matraz de vacío. Además, frotando su espalda. Después de esta masa se transfiere a un matraz cerca de la llama del quemador. Contenedor con suspensión de suelo se agitó en un agitador durante 5 min. A partir de entonces, se dejó sedimentar durante aproximadamente 30 segundos. Esto es necesario con el fin de permitir que las partículas grandes se asienten. Después se utiliza una masa media minutos para preparar la preparación.

Los recuentos de células en frotis fijos

, разработанному Виноградским. estudio microscópico directo del suelo se lleva a cabo por el método de los estudios microbiológicos, desarrollado Vinogradskii. En cierto volumen de la suspensión se contó el número de células de microorganismos. El estudio de frotis fijos puede almacenar medicamentos en el largo plazo y realizar cálculos en cualquier momento.

Preparación del fármaco como sigue. Una cierta cantidad de suspensión (típicamente 0,02-0,05 ml) se aplica con una micropipeta sobre el portaobjetos. A esta solución se añadió una gota de agar-agar (polisacárido agaropectina mezcla y agarosa extrae de algas pardas y rojas Mar Negro), se agitó rápidamente y se extendió sobre un área 4-6 sq. cm. secados al aire Pap y fija durante 20-30 minutos. alcohol (96%). A continuación, el fármaco se humedeció con agua destilada y colocado en el p-p carbólico eritrosina 20-30 min.

Después de la tinción, se lava y se seca en aire. Los recuentos de células realizan desde la lente de inmersión.

Siembra en medios sólidos

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. métodos microscópicos para examen microbiológico pueden detectar un gran número de microorganismos. Pero a pesar de esto, el método de inoculación es el más común en la práctica. Su esencia consiste en la siembra de la cantidad del medicamento (suspensión de suelo) en una placa de Petri en un medio sólido.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Este método de investigación microbiológica tiene en cuenta no sólo la cantidad sino también el grupo, y en algunos casos, y la composición de especies de la flora microscópicas. Contar el número de colonias producidas, por lo general de la parte inferior de la placa de Petri a la luz transmitida. En el área calculada colocado un punto marcador o tinta.

Análisis del agua

La microflora del cuerpo de agua, como regla general, refleja la composición microbiana del suelo a su alrededor. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. En este contexto, los métodos de análisis sanitario y microbiológico de agua y el suelo son de particular importancia práctica en el estudio del estado de un ecosistema particular. El agua fresca contiene, por regla general, cocos, bacterias en forma de barra.

Anaerobios en agua que se encuentran en pequeñas cantidades. Como regla, se multiplican en la parte inferior de los cuerpos de agua, en el barro, tomando parte en el proceso de purificación. océanos la microflora y mares ventajosamente representados bacterias halófilas (halófilas).

En el agua, pozos artesianos son prácticamente no hay microorganismos. Esto es debido a la capacidad de filtración de la capa de suelo.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Los métodos convencionales de investigación microbiológica del agua consideran la definición de índice si-microbiana y coli-título o. El primer indicador define el número de bacterias en 1 ml de líquido. índice Coli representa el número de coliformes presentes en un litro de agua, y si el título de – el número mínimo o máximo líquido de dilución en el que todavía pueden ser detectados.

Determinación del número de microbios

Este método sanitario examen microbiológico de agua es como sigue. En 1 ml de agua se determina el número de anaerobios mesófilos y facultativos (Intermedio) aerobios capaz de en agar carne-peptona (medio primario) a 37 ° C. durante el día para formar colonias visibles con un aumento de 2-5 p. o el ojo desnudo.

является посев. El paso clave del método de análisis microbiológico de agua se siembra. Debido a que cada muestra se siembra al menos 2 volúmenes diferentes. Cuando el análisis del agua del grifo en cada taza es de 1-0,1 ml de líquido puro y contaminado 0,01-0,001 ml. Para la inoculación de 0,1 ml o menor volumen de fluido se diluye con agua destilada (estéril). Consistentemente preparar diluciones decimales. 1 ml de cada uno de ellos se realizan en dos placas de Petri.

La crianza llena de agar nutritivo. Primero debe fundirse, y enfriar a 45 grados. Después de agitar, el medio activo se deja sobre una superficie horizontal para la solidificación. A 37 grados. cultivos se producen durante todo el día. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. El método considerado de la investigación microbiológica del agua tiene en cuenta los resultados de esos platos donde el número de colonias en el intervalo de 30 a 300.

aire

Se considera una planta de tránsito para los microorganismos. являются седиментация (оседание) и аспирация. Los principales métodos de estudios microbiológicos son la sedimentación de aire (sedimentación) y la aspiración.

ambiente de aire microflora se divide arbitrariamente en variable y constante. El primer grupo incluye levaduras, cocos cromogénico, espora de Bacillus coli y otros microorganismos que son resistentes a secado, exposición a la luz. Representantes de la microflora variables, que penetran en el aire de su hábitat habitual, conservan siempre su vitalidad.

En el aire de las grandes ciudades microorganismos en mucho más que en el entorno del aire de las zonas rurales. A través de los mares, los bosques son muy pocas bacterias. purificación del aire facilitar la precipitación: nieve y la lluvia. Interior microbios mucho más que en espacios abiertos. Su número se incrementa en el invierno en la ausencia de ventilación regular.

sedimentación

считается простейшим. Este método de investigación microbiológica en microbiología se considera que es el más simple. Se basa en la sedimentación de las gotitas y las partículas en la superficie del agar en una placa de Petri abierta bajo la gravedad. método de sedimentación puede no determinar con precisión el número de bacterias en el aire. El hecho es que en una taza abierta para coger la fracción fina de las partículas de polvo y gotitas de bacteriana bastante difícil. En la superficie retenido partículas principalmente grandes.

Este método no se utiliza para el análisis de aire. Este entorno se caracteriza por grandes fluctuaciones en la velocidad del flujo de aire. La sedimentación puede, sin embargo, utilizarse en ausencia de dispositivos más sofisticados o fuente de energía eléctrica.

Determinación del número de microbiana realizado por el método de Omelyansky. De conformidad con ello, durante 5 minutos sobre una superficie de 100 agar cuadrado. cm se instala un número de bacterias está presente en 10 litros de aire.

Ordenar 535 "Sobre la unificación de métodos microbiológicos de investigación"

Análisis bacteriológico ocupa un lugar importante en las actividades clínicas y de laboratorio complejos dirigidos al diagnóstico, prevención y tratamiento de diversas enfermedades infecciosas. Sin embargo, el estudio del medio ambiente, que no están limitados.

De particular importancia es el análisis bacteriológico de material biológico en los hospitales. Para la investigación llevada a cabo en los centros de salud, el aumento de los requisitos. El propósito de la Orden "en la unificación de los métodos microbiológicos de investigación" es mejorar el análisis bacteriológico, la mejora de la calidad y eficiencia de diagnóstico microbiológico.

El examen microscópico de frotis en mujeres

Es un método de clave de análisis para el diagnóstico de infecciones, infecciones de transmisión sexual, e infecciones oportunistas (bacterias oportunistas).

El análisis microscópico para evaluar la composición cualitativa y cuantitativa de la microflora, comprobar la corrección de muestreo. Por ejemplo, la presencia de epitelio vaginal en frotis tomados del canal cervical indica una violación de las reglas de selección de una muestra biológica.

Se dice que el examen microbiológico en este caso generalmente es seguido por algunos problemas. Están relacionados con el hecho de que en el tracto genital inferior está normalmente presente una microflora diverso que varía a diferentes edades. Para mejorar la eficiencia de la investigación y han desarrollado normas estandarizadas.

El diagnóstico de las infecciones virales

Se lleva a cabo por métodos de detección de ARN y ADN patógenos. Ellos se basan principalmente en la determinación de secuencias de nucleótidos en material patológico. Para este fin, las sondas moleculares. Se producen artificialmente ácidos nucleicos complementarios a (complementaria a) los ácidos virales marcadas con un marcador radiactivo o biotina.

La peculiaridad del método se repite copiar el fragmento de ADN específico que contiene unos pocos cientos de (o decenas de) el nucleótido pares. replicación (copia) es que la extensión puede comenzar sólo en ciertas unidades. cebadores (primers) utilizados para crearlos. Son oligonucleótidos sintetizados.

PCR de diagnóstico (reacción en cadena de la polimerasa) es simple en ejecución. Este método le permite obtener rápidamente el resultado mediante el uso de una pequeña cantidad de material patológico. Usando PCR de diagnóstico identifica infecciones latentes (ocultos) aguda, crónica y.

Cuando se considera más preferible la sensibilidad de este método. Sin embargo, los sistemas de pruebas actuales no son lo suficientemente confiable, por lo que el diagnóstico por PCR no puede sustituir completamente a los métodos tradicionales.